Miksi käytetty magnesiumkloridi PCR ?

Lähikuvatiedemies käyttäenPCR cycler laboratoriossa . vkovalcik / iStock / Getty Images

Kun rikospaikalle tutkija tai lääkäri saa DNA-näyte, ei useinkaan ole tarpeeksi DNA käytettävissä kunnolla analysoida sitä.Jotta simuloida kehon oma DNA-replikaation prosessi, tutkijat kehittivät prosessia kutsutaan PCR, joka voi toimia kuin Xerox kone ja tehdä kopio jälkeen kopio DNA-näytteen.On olemassa monia komponentteja PCR-reaktiossa, ja magnesiumkloridi on yksi kaikkein tärkeimmistä.

Jäljittelemällä elin

  • Polymeraasiketjureaktio (PCR) on kehitetty, jotta voidaan matkia luonnon oma tapa jäljittelevän DNA: ta.DNA on toistuva sekvenssi nukleotidien, ja kukin nukleotidisekvenssi sisältää kolme osaa.Selkäranka DNA on toistuva sokeria ja fosfaatti yksikkö, ja jokainen sokeri on typpipitoisen emäksen liitetty siihen.On neljä typpiemäksistä;guaniini, sytosiini, adeniini ja tymiini.DNA koostuu kahdesta sokeria fosfaatti osa kulkee rinnakkain toisiinsa kaksi typpiemästen liittymällä välillä joka toinen sokereita.Kun DNA replikoituu elin, entsyymiä nimeltä he

    likaasin taukoja lukuun sidokset typpiemäksiä.Toinen entsyymi, DNA-polymeraasia, pitää uusi nukleotidin tilalle vanhoja.Lopuksi, kolmas entsyymiä nimeltä DNA-ligaasia liittyy uusien molekyylien takaisin yhteen.

PCR-reaktio komponentit

  • muutamia muutoksia on tehtävä, jotta voitaisiin jäljitellä DNA lab reaktiossa.Sijasta helikaasin, PCR-reaktio yksinkertaisesti käyttää lämmön rikkoa sidokset typpiemäksiä.Ihmisen DNA-polymeraasi ei ole riittävän vakaa kestämään näitä lämpötiloja.Samanlainen molekyyli nimeltään Taq tai lämpöstabiili polymeraasi, käytetään sen sijaan, koska se kestää lämpöä vaatimukset PCR.Lisäksi, PCR-reaktio vaatii vapaan nukleotidin, puskuria, ja magnesiumia.

rooli Magnesiumkloridi

  • Magnesiumkloridi on edullinen menetelmä, jossa lisätään magnesiumia PCR-kokeen.Termostabiili polymeraasi vaatii magnesiumin läsnä ollessa, joka toimii kofaktorina reaktion aikana prosessin.Sen tehtävänä on samanlainen kuin katalyytin: magnesium ei kuluteta reaktiossa, mutta reaktio ei voi edetä ilman läsnäoloa magnesiumia.

vaikutukset Runsas magnesium

  • enemmän magnesiumia, joka on lisätty PCR-reaktiossa, sitä nopeammin reaktio etenee.Kuitenkin, että ei ole välttämättä hyvä asia.Jos liikaa magnesiumia on läsnä, DNA-polymeraasi toimii liian nopeasti ja usein tehdä virheitä kopioinnin.Tämä johtaa moniin eri osa DNA tuotetaan jotka eivät välttämättä edusta alkuperäisen näytteen, joka oli säädetty.

vaikutukset niukkojen Magnesium

  • Jos magnesiumia on rajallinen reaktion, se ei mene niin nopeasti kuin pitäisi, jos ollenkaan.Voit yrittää juosta 40 syklin PCR mutta ei saada kopioita sinulle tarkoitettu.Kunkin syklin PCR kaksinkertaistaa DNA: n määrän koeputkessa eksponentiaalisesti.Joten kun käytät aluksi pieni määrä, voit päätyä monta kertaa, että alkuperäisestä määrästä lopulta.Jos ei ole riittävästi magnesiumia, jotkut DNA-polymeraasi ei voi aktivoida, ja se ei toimi.Kuitenkin, lämpö on purkaa DNA, joka on jo olemassa ja sitä ei liittyi.Näin ollen, koko koe voidaan pilalla, jos ei ole riittävästi magnesiumia läsnä.

377
0
1
Lukio