Miten Lasketaan bakteerien

Steriili siirrostussilmukkaa käytetään valitasiirtomaa panna neste kulttuuriin . Hemera Technologies / Photos.com / Getty Images

Tutkijat käyttää laimennossarjoja (sarja 1:10 laimennoksia) laskea väestötiheys bakteeriviljelmiä.Kun pisara sisältävän viljelmän pieni määrä bakteereita on päällystetty ja inkuboitiin, jokainen solu teoriassa on riittävän kaukana muista soluista, että se muodostaa oman pesäke.(Todellisuudessa jotkut pesäkkeet voivat olla jälkeläisiä kaksi lähistöllä soluja, mutta tämä on harvinaista laimeassa kulttuureissa, ja niin pesäkkeiden lukumäärä on erittäin hyvä arvio solujen määrä alun perin siirrettiin levy.) Koska asukastiheys ontuntematon, erilaisia ​​laimennoksia on käytettävä, jotta päätyä yksi levy sopiva määrä siirtomaita.

mitä tarvitset

  • 6 koeputkissa
  • 6-agarmaljoille
  • Bakteerien kulttuuri
  • pipetillä
  • 0,1 ml ja 1 ml: ssa steriiliä pipetinkärjet
  • liekki
  • L-muotoinen lasisauva

sarjalaimennoksia

  1. Levy kuuden koeputkeen (joista kukin sisälsi 9 mlKasvun media) kuin 1 6. Label kuusi agarmaljoille kuin 1 6

    . Käytä pipetillä ja steriili 1 millilitra (ml) pipetinkärjet siirtää 1 ml bakteeriviljelmän putkeen 1.

  2. Sekoita hyvin ja siirto1 ml putkesta 1 putkeen 2 käyttämällä pipettiä ja steriili 1 ml vinkkejä.

  3. Toista vaihe 2 jäljellä putkien, joka kerta siirtämällä 1 ml päässä viimeksi käytetty putki seuraavaan putkeen.

  4. Käytä pipetillä ja steriili 0,1 ml vinkkejä siirtää 0,1 ml putkesta 1 agarmaljalle.Liekitetään L-muotoinen lasisauva ja käyttää sitä levittää pudota tasaisesti levyn.Inkuboi levyä 48 tuntia sopivassa lämpötilassa bakteereja käytetään.Erityyppiset bakteerit ovat eri optimaalinen kasvu lämpötiloissa.Jos et löydä optimaalisen kasvun lämpötilaa vertailuaineisto, kokeile inkuboimalla levyjä 25 ja 37 astetta.

  5. Toista vaihetta 4, aina siirtää nesteen eri koeputkeen päälle sen vastaava levy.

Väestö Laskelmat

  1. Noudata kuusi levyt ja valitse yksi 30-200 eristetty pesäkkeitä.

  2. Kerrotaan pesäkkeiden määrä kilpeen 10 laskea solujen määrä per ml kulttuurin laimennus putki käytetty.

  3. Kerrotaan numero vaiheesta 2 10 ^ (rekisteritunnus) laskea solujen määrä per ml alkuperäistä kulttuuria.Arvo 10 ^ (rekisteritunnus) on laimennuskerroin kulttuurin käytettiin ymppäykseen että levy.

Vinkkejä & amp;Varoituksia

  • sisällyttää kaikki tarvittavat ravintoaineet agarmaljoille.Auksotrofisia bakteereja vaatia tiettyjen aminohappojen lisäksi perus median ainesosia.Eri auksotrofeille on eri ravinteiden vaatimukset.Consult vertailuaines selvittää mikä aminohappoja, jos mitään, sinun bakteerit tarvitsevat.
  • Odota sekunnin välillä palavat lasisauvan ja käyttää sitä, jotta se ei pala, bakteerit.
  • Käytä aina laboratorio käsineitä bakteereja.
147
0
1
Lukio