Miten saada Ravinneagar Petri Astiat

Petrimaljat Jupiterimages / Comstock / Getty Images

Nestemäinen ravintoliuos käytetään kulttuuriin bakteerit, kuten Escherichia coli.Reseptejä tämä liemi vaihtelevat bakteerilajit ja läsnäolo geneettisiä muunnoksia, esimerkiksi antibioottiresistenssiä.Liemi voidaan kiinteäksi lisäämällä agar, jonka avulla bakteerit muodostavat erillisiä pesäkkeitä, kun taas nesteviljelmässä ne yksinkertaisesti liueta äänenvoimakkuutta.Tämä on yksinkertainen, mutta olennainen tekniikka kehittyneitä menetelmiä kuten geenikloonaus tai mikrobiologisia määrityksiä.Tässä artikkelissa oletetaan, että standardi laboratorio Escherichia coli -kantoja on tarkoitus viljellä Luria-liemessä (LB) agarmaljoilla (tai petrimaljoihin).

mitä tarvitset

  • 10 g Bacto-tryptoni
  • 5 grammaa hiivauutetta
  • 5 g NaCl: a
  • 1 millilitra 1 NNaOH:
  • 15 grammaa agaria tai agaroosi
  • lisäravinteet, esimantibiootit, galaktosidit
  • Autoklaavi
  • Laboratorio-luokan lasiastiat
  • useita hihat petrimaljoja
  • laminaarivirtauskaapissa
  • bunsenpoltin
  • Autoklaavi ja kulutustavarat
  • vaa'at ja kulutustavarat

Ohjeet

  1. Punnitaan 10 grammaa bakteeri-luokan tryptonia, 5 g hiivauutetta, 5 g natriumiakloridi, 15 grammaa agaria tai agaroosi, ja 1 ml 1 N natriumhydroksidia.Sekoita nämä joiden tilavuus tislattua ja autoklavoitua steriiliä vettä, kunnes 1 litra aine saadaan.Autoklavoida median löyhästi pulloissa tai pulloihin 25 minuuttia.Annetaan jäähtyä noin 50 asteeseen ennen kuin lisäät reagenssit että tuhotaan korkeassa lämmössä, kuten antibiootteja tai muita ravintolisiä.

  2. Anna autoklavoitu tiedotusvälineiden jäähtyä 50 asteeseen ja ei alempi kuin 45 astetta, kuten agar asettaa sen astiaan ennen kuin se voidaan kaataa.Hanki steriili petrimaljoja ja kaada tarpeeksi kattamaan koko pinta levyn ja vähintään puolet sen syvyys.Vältä ylitäyttö levyt ja edullisesti eivät salli agar yhteyttä yläreunaan lautasen.Anna levyjen jähmettyä steriilissä ympäristössä (esim alle laminaarivirtauskaapissa) jättämällä kannet pois ja nurkassa huppu.

  3. Kuivaa levyt.Vaikka levyt voidaan käyttää heti, kun ne on asetettu, jonkin verran kosteutta on läsnä pinnalla agar, joka estää bakteerien pesäkkeitä tarttumasta riittävästi.Näin ollen, se on parasta kuivata levyt ennen kuin kaikki bakteerit, esimerkiksi jättämällä ne istua huoneenlämmössä muutaman päivän tai puolen tunnin ajan laminaarivirtauskaapissa tai 37 ° C inkubaattorissa.

  4. Säilytä levyt.Kuivatut levyt olisi päällekkäin ylösalaisin (käänteinen) niiden kannet ja palautettiin alkuperäiseen pakkaukseen, teipillä kiinni ja joko kääritään folioon valolle tai sopivaan astiaan.Aina kirjoittaa valmistuspäivämäärä levyille ja vältä jos levyt ovat yli 2 kuukautta vanha.

Vinkkejä & amp;Varoitukset

  • Suorita koska monet edellä mainitut vaiheet (mieluiten kaikki) kuin mahdollista steriilissä ympäristössä (esim alle avotulen tai laminaarivirtauskaapissa) pysäyttää ilmassa bakteerien epäpuhtauksien pääsyn ja kasvavat tiedotusvälineissä.
15
0
1
College