Sådan bruges Bakterier i Genetic Engineering

bakterier http://www.vedicsciences.net/design/bacteria5.jpg

Bakterier er nyttige redskaber i genetisk modifikation.Gennem brug af plasmider, cirkulære dele af udskiftelige bakteriel DNA, organismer, såsom andre bakterier, kan omdannes genetisk.Denne vejledning beskriver de grundlæggende metoder, der er involveret i at bruge bakterier til gensplejsning af en anden organisme.

hvad du har brug

  • Ikke-dødelige bakterier arter (helst en harmløs variant af Escherichia coli)
  • Anden ikke-dødelige bakterier arter
  • petriskål
  • Bakterier inkubator
  • Begrænsning enzymer til målgenet
  • 2 Steril sløjfer
  • Varmt vandbad
  • Reagensglas

Forberedelse af genet af interesse

  1. Få en prøve af de første bakterier arter ved pensling vedlagte koloni med en steril løkke.

  2. Wave det inokulerede loop i et reagensglas gennem et vandbad ved ca. 48 grader Celsius i fem sekunder.

  3. Tilføj nogle ml restriktionsenzym til reagensglasset og opvarmet, podet sløjfe.Denne

    restriktionsenzym varierer afhængigt af genet af interesse, som kan overføres til andre bakteriearter.

Transforming de andre bakterier Arter

  1. Dyp en anden steril loop i en koloni af den anden bakteriearter, den ene, der skal omdannes.

  2. Spred bakterierne jævnt over en petriskål indeholdende agarose medium ved at skubbe det podede sløjfe på tværs af agarose.

  3. Lad bakterierne inkuberes i to dage i en inkubator, således at bakteriekolonier dannes.

  4. Tilføj blandingen oprettede tidligere indeholder genet af interesse for petriskålen indeholder de bakteriekolonier.

  5. Lad bakterierne inkuberes i to dage i inkubatoren.Dette gør det muligt for arter optagelse generne tilsat til skålen og indsætte dem i deres genomer.

  6. udtænke en metode til at teste de transformerede bakterier at se om de sidestilles generne.For eksempel, hvis genet Taxameterbevillinger bakterierne antibiotikaresistens, kan det være praktisk at tilføje diske ampicillin til agarplade.Hvis de overlever, de tog op genet.

Tips & amp;Advarsler

  • Når du vælger et gen til at bruge til transformation, skal du vælge et gen, der kan tages fra en anden bakterie nemt.
  • Også være sikker på at vælge et gen, der kan testes for at se, om den procedure, virkede.For eksempel kan et gen, der gør bakterier glød er let testes af udseende.
  • Brug ekstrem forsigtighed når du arbejder med bakterier, dødelige eller ikke-dødbringende.
  • Vask hænder med antibakteriel sæbe før, efter og under ethvert arbejde med bakterier i gensplejsning.

Ressourcer

  • Sample bakteriel transformation lab
712
0
1
Andre Computer Hardware