Sådan Forbered Bufferopløsninger

Lab forsyninger til at gøre en Tris bufferopløsning Foto venligst udlånt af Emmi P. @ morgueFile.com

Bufferopløsninger modstå ændringer i pH, fordi de indeholder svage syre-base-konjugater, der neutraliserer H + og OH- ioner.Bufferopløsninger består af svage syrer eller baser og salt af denne syre eller base.Udvælgelse af et passende buffersystem afhænger af pH-området for buffering.De fleste biologiske reaktioner forekommer ved et pH-område på 6 til 8. phosphatbuffere buffer for pH-området fra 6,5 ​​til 7,5.Carboxylsyre buffere er nyttige fra pH 3 til 6. boratpuffere fungere fra pH 8,5 til 10. Aminosyre buffere, såsom glycin og histidin udføre i en mangfoldighed af pH-intervaller.Tris-buffer er en af ​​de mest almindeligt anvendte puffersystemer i biologi laboratorier.Beregninger for en Tris bufferopløsning vil blive anvendt i det følgende eksempel, men den metode gælder for alle pufferopløsning.

hvad du har brug

  • destilleret vand
  • Base pulver eller krystaller
  • Saltsyre (HCI)
  • måleglas
  • målekolbe
  • magnetomrørerstav
  • Omrøring Varmeplade
  • pH-meter med sonde
  • Scale
  • Calculator
  • Brug produktet af den endelige løsning molariteten og volumen for at bestemme mol af basen påkrævet.For eksempel, hvis 2 liter af en 0,1 M opløsning af Tris-buffer er nødvendig, så antallet af mol Tris kræves, er:

    0,1 mol / liter x 2 liter = 0,2 mol Tris-base

  • Beregn massen af ​​pufferkræves ved at multiplicere antallet af mol brug med molekylvægten af ​​basen.For eksempel massen af ​​0,2 mol Tris-base lig med:

    0,2 mol Tris x 121,1 g / mol Tris = 24.22 g Tris

  • Mål passende masse af base på en skala.

  • opløses basen i destilleret vand under anvendelse af en magnetisk omrørerstav og omrøring varmeplade.Opløse den i et volumen vand kun lidt mindre end den endelige løsning volumen (950 til 975 ml for hver liter af den endelige opløsning).PH i Tris-buffer ændrer sig med koncentration og behov omstilling, hvis der anvendes for lille en indledende volumen.Det er også bedst at forberede buffer ved den samme temperatur den skal bruges under assayet eller forsøg som Tris har store temperaturafhængige ændringer i pH.Den vandige opløsning Tris med 1 M saltsyre under anvendelse af et pH-meter

  • titreres.

  • Opløsningen bringes endelige volumen med destilleret vand i en målekolbe.

Tips & amp;Advarsler

  • For at spare tid ved udarbejdelsen af ​​en bufferopløsning, kan du bruge premade buffer koncentrerer i den ønskede pH og fortyndes til den ønskede molaritet og volumen.Forbered pufferopløsning ved den samme temperatur den skal bruges for at undgå væsentlige pH-ændringer.Undgå tidskrævende pH-justeringer, titreres efter fortynding til den ønskede koncentration.Opløsning i for lille et volumen vil føre til gentagne titreringer.
  • Udvis forsigtighed ved håndtering af syrer og baser.Bær beskyttelsesbriller.
336
0
1
Videnskab